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2025山西长治知识大全:流式细胞仪图分析@网站小助手

来源:视频教程网 作者:吴老师 时间:2023-09-18 05:17:00
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提示:

流式细胞周期结果 怎么分析

细胞周期至少有两种做法,最常见的如下图分析: 这个是BrdU和7-AAD方法检测细胞周期。红色的gate就是G1期,绿色的就是S期,橙色的就是G2/M期。BrdU, PI, 或者EdU方法和这个一样分析 如果单用PI等DNA染料染色,需要专业软件来分析计算了。 比如这个图,是DNA染料单染,其中粉色部分是G1期,黄色部分是S期,绿色部分是G2/M期。中间的分布一般是通过FlowJo这样的软件计算自动生成的。

流式细胞仪测定细胞周期各时相的原理和基本步骤(不用说具体使用的量)
提示:

流式细胞仪测定细胞周期各时相的原理和基本步骤(不用说具体使用的量)

在细胞培养液中加入模拟核苷酸EdU (比较老的方法也可以用BrdU)。培养一小时 后,更换为正常的培养液继续培养。模拟核苷酸可以像天然核苷酸一样被细胞摄取并整合入新合成的DNA。 培养一段时间后(一般小于一个细胞周期),固定细胞。根据所使用模拟核苷酸的不同,使用不同的方法。EdU,改变缓冲液的pH值,就会发出荧光。而BrdU则需用荧光抗体识别,需要对细胞膜和核膜进行通透处理。 再加入PI对DNA染色。 在二维坐标图上,横坐标设为线性PI荧光强度,纵坐标设为模拟核苷酸的荧光强度(log)。 典型的图就像下面一样: G1, G2 和S期就按照图中的划分来做。G1期的细胞没有新合成DNA,所以BrdU信号是阴性,而PI的信号位于1倍体期。S期是正在合成DNA,所以BrdU都是阳性。G2期是已经合成好了2倍的DNA,所以位于2倍体期,信号是G1期的一倍。这个图中,G1 PI信号是300, G2就是600.

更新时间 2023-09-18 05:17:00